medios para cultivos de células
Los aminoácidos y vitaminas satisfacen las especificaciones del National Research Council la American Chemical Society y de la U.S. Pharmacopeia. Las sales minerales son grado reactivo o para análisis. Cada uno de estos componentes ha sido evaluado previamente en cultivos celulares en cuanto a su capacidad para promover o mantener el crecimiento celular, además de comprobar que no producen efectos citotóxicos.
El agua utilizada en la preparación de éstos medios cumple con los requisitos de agua para inyectables especificados en la Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos.
La esterilización se realiza por presión positiva utilizando filtros de membrana de 0.22 µ y/o 0.1 µ efectuando el llenado de los envases en un ambiente aséptico controlado mediante filtros HEPA. Para asegurar la esterilidad del producto se han validado cada una de las fases del proceso, comprendiendo la eficiencia de la limpieza y sanitización de las áreas, monitoreo ambiental, ciclos de esterilización de todo el material que tenga contacto con el producto y prueba de integridad de los filtros esterilizantes finales.
La mayoría de estos medios se preparan 1X listos para usar o concentrados 10 veces para diluir con agua, en presentaciones de 100 ml y 500 ml.
En los medios con buffer HEPES solo se ajusta la concentración de cloruro de sodio para mantener la osmolalidad dentro de los límites de aceptación.
Control de calidad
De cada lote de producto terminado se toman muestras de acuerdo a los lineamientos establecidos en Buenas Prácticas de Manufactura y son sometidas a las siguientes pruebas de control de calidad:
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- Pruebas de esterilidad
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En las muestras de cada lote de producto se investigan bacterias y hongos usando como medio de
cultivo caldo de soya tripticaseína y caldo tioglicolato, incubando las pruebas durante 14 días.
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- Análisis físico-químico pH.
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Se comprueba que el pH esté ajustado al valor caracterísitico establecido
para cada tipo de medio.
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- Osmolalidad
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Se utiliza un osmómetro de precisión para comprobar que está dentro de especificación.
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- Capacidad promotora del crecimiento
- Con cada lote de medio nutritivo se prepara medio completo adicionándole suplementos específicos
controlados y se prueba su capacidad para promover el crecimiento celular usando como mínimo dos
líneas celulares. Los resultados se comparan contra los obtenidos con estándares desarrollados para
cada
tipo de medio, comprobando además la ausencia de citotoxicidad.